肠道免疫类器官模型的开发与应用2025-03-24 08:51:57
IIOs的开发为研究肠道免疫反应和开发新的治疗方法提供了新的工具，并有助于深入了解药物对肠道的影响。构建肠道类器官的另一种方法涉及干细胞的定向分化，包括ESCs和PSCs。将ESCs和PSCs定向分化为内胚层细胞，再进行3D培养。PSC来源的肠道类器官是一种复杂、耗时且高度特异性的发育方案。这个过程需要以精确的剂量和时间添加特定的生长因子，以引导PSCs形成3D肠上皮结构。这种方法也被用于生成人类前内胚层和后内胚层类器官，包括胃、小肠和结肠类器官。在成功构建肠道类器官后，需要对其形态、细胞组成、标志物和功能进行鉴定。首先对形态进行鉴定，一般情况下，人肠道类器官在光学显微镜下应为囊球状或芽体状，中间为空腔，外侧为紧密接触的柱状上皮细胞。空腔及与外界交界处的边缘清晰，细胞透亮。人肠道类器官正常核型应为46, XY或46, XX。细胞总数为1×104~2×105个/类器官。它们的大小从0.5-2毫米不等。
在细胞组成方面，人体小肠类器官中应含LGR5阳性的肠干细胞、KI67阳性且LGR5阴性的短暂扩增性细胞、ALPI阳性的吸收型肠上皮细胞、MUC2阳性的杯状细胞、LYZ阳性的潘氏细胞和CHGA阳性的肠内分泌细胞。且吸收型肠上皮细胞的数量占比应不低于30％。人体大肠类器官中应含LGR5阳性的肠干细胞、KI67阳性且LGR5阴性的短暂扩增性细胞、ALPI阳性的吸收型肠上皮细胞、MUC2阳性的杯状细胞和CHGA阳性的肠内分泌细胞。且杯状细胞的数量占比应不低于 30％。
在标志基因方面，人肠道类器官应检测到肠干细胞中的标志基因LGR5、杯状细胞中的标志基因MUC2、吸收型肠上皮细胞中的标志基因ALPI、肠内分泌细胞中的标志基因CHGA、增殖细胞中的标志基因MKI67的表达。其中小肠来源的类器官还应检测到潘氏细胞标志基因LYZ的表达。
出自《类器官在食品科学研究中的应用进展 》作者:马爱进，白如进，周军君.
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