针对类器官的功能鉴定，主要有以下方法。杯状细胞功能评估：黏蛋白测试；溶菌酶测量：碱性磷酸酶和溶菌酶染色；类器官活力评估：钙黄嘌呤-乙酰氧基甲基lester染色法；渗透性测试：异硫氰酸荧光素葡聚糖4kDa，40kDa测定；吸收功能评价：Forskolin测定。在功能指标方面，人体小肠类器官中应检测到碱性磷酸酶及溶菌酶，人体大肠类器官应检测到黏蛋白。
 

肝脏发育过程中的主要来源是内胚层上皮，进一步产生肝芽结构，再产生肝母细胞，随后产生肝细胞和胆汁上皮组织。PSCs是一种可以自我更新并分化为特殊细胞类型的细胞，具有分化的全能性。有研究显示PSCs通过激活素A的作用被诱导到肝内胚层细胞中，然后响应成纤维细胞生长因子和BMP的发育信号通路完成分化。当使用Matrigel在3D培养条件下生长时，这些细胞能够产生类器官，并且可以分化形成成熟的功能性肝细胞。此外，与基质细胞共培养，人脐静脉内皮细胞和人间充质干细胞都具有干细胞潜力，可以帮助来自PSCs的肝脏内胚层细胞向肝脏类器官衍生。
 

成功构建完肝脏类器官，为了将肝脏类器官实际用作体外模型研究，需要对其质量有一定要求，包括它们的大小、每个大小的靶向细胞数、细胞组成、基因表达和功能测定。首先，hPSCs来源的肝脏类器官应在100∼500μm的直径范围内，前提是细胞/类器官超过1,000个。此外，建议hPSCs来源的肝脏类器官设置直径限制，因为营养和氧气灌注的潜在限制可能导致中央区域坏死。其次，肝脏类器官的主要应用是作为肝毒性评估平台。因此，它们的细胞组成主要反映肝脏的细胞组成。通常根据以下方法评估。使用流式细胞术测量血浆白蛋白的表达水平来确定定量评估肝类器官中肝细胞的比例。由于人类肝组织通常由＞70％的肝细胞组成，因此建议使用表达＞70％ALB水平的类器官。
 

出自《类器官在食品科学研究中的应用进展 》作者:马爱进，白如进，周军君.