慢病毒载体转导效率优化策略与技术突破2025-06-05 08:50:45
为提高转导效率及载体拷贝数，需要考虑包装片段及前病毒的长度、包膜表面蛋白组成、HSC的LVV抗性、质粒共转染的复杂工艺、整合位点的染色质开放程度、干细胞数量与干性等。保留β-珠蛋白HS2、HS3、HS4区“编码核心“、构建靶向HSC的新型包膜BaEV或重组包膜蛋白、添加转染HSC小分子增强剂（如Vectofusin-1、CsH、雷帕霉素等），可有针对性地提高转导效率。病毒载体成本高昂且工艺改进难度大，阻碍基因添加疗法的临床转化。针对仅造成pre-mRNA异常剪接的缺陷基因，可应用无需载体的RNA疗法。已报道剪接转换寡核苷酸修复IVS2-654突变，反义寡核苷酸修复IVS1-110突变，人工转录因子gg1-VP64-HA靶向血红蛋白γ亚基启动子及诱饵寡核苷酸或microRNA破坏Oct-1、MYB等γ-珠蛋白转录阻遏因子mRNA。
正常成人的HbF水平不超过2％。HbF持续高表达被定义为遗传性持续性胎儿血红蛋白增多症，此类β-地中海贫血患者贫血较轻。γ-链代替β-链与过剩的α-链结合，可恢复Hb功能并减少红细胞前体损伤。大量临床数据显示，HbF只需达到总Hb水平的30％，即可临床治愈β-地中海贫血。HbA的氧亲和力低于HbF，胎儿脱离子宫低氧环境后，HbA更适合肺与外界、血液与组织间的气体交换。高水平HbF不利于向组织释放氧，也会影响胎盘内的氧气交换，但尚无重激活HbF的不良反应报道，仍需长期观察。相较于基因添加，编辑更小片段、解除HbF沉默可能是更直接高效的策略。
出自《地中海贫血基因治疗研究进展及思考》 作者:高欣洁，刘艳，王大威.
