慢病毒载体基因治疗的安全风险与优化策略2025-06-06 08:22:06
目前方案有破坏主要沉默因子BCL11A或ZBTB7A在HBG1/2启动子区的结合位点，破坏BCL11A红系增强子的结合位点，下调与BCL11A相互作用的GATA1、TAL1、KLF1、SOX6或NuRD等转录因子。如已有LVV包装BCL11A shRNAmiR或ZNF410/BCL11A双靶点shRNAmiR的临床前研究。但干扰上述蛋白可能会导致其他生理过程失调。LVV在非分裂和分裂细胞中均能实现稳定整合，但需要考虑产生插入诱变和载体动员的风险。插入诱变可能引起的严重安全性问题：LMO2基因被γ反转录病毒的长末端重复序列插入激活，导致受试者罹患白血病；1例β-地中海贫血患者转染LVV后出现HMGA2基因克隆扩增；接受Skysona治疗的67例脑型肾上腺脑白质营养不良症患儿中，7例患上血液系统肿瘤，其中大多存在MECOM-EVI1克隆扩增及KRAS、WT1、CDKN2A等体细胞突变。
由于转基因及病毒LTR被随机整合到转录活跃区域，外源性启动子/增强子会扰乱附近基因表达，引起克隆优势化、异常RNA剪接等，感染野生型慢病毒后可能出现载体动员和重组，并产生复制型慢病毒。可通过染色质特定区域整合（改造LEDGF/p75或phiC31整合酶）、删除辅助蛋白、设计LVV假型化衣壳或cre酶介导自删除等方法提高安全性。细胞穿膜肽、病毒样颗粒、脂质纳米颗粒、纳米金颗粒等递送质粒DNA、mRNA或Cas9的策略已在其他疾病模型中实现。这些创新技术为克服病毒载体局限性提供了新的研究方向。
出自《地中海贫血基因治疗研究进展及思考》 作者:高欣洁，刘艳，王大威.
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