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问：如何检测成骨细胞分化标志基因表达？
样品收集：按1 4 1中方法提取WT小鼠与Gm5532 KO BMSCs，5×105 孔接种于6孔板中，细胞长满后进行成骨诱导分化，依次在不同天数收取样品。2026-09-28
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问：如何检测成骨细胞矿化能力？
答：胰酶消化方法1 4 1中培养的WT及Gm5532 KO BMSCs，5×105 孔接种于6孔板中，待细胞长满后，进行成骨诱导分化，分化诱导21 d后，2026-09-28
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问：如何检测成骨细胞分化标志物碱性磷酸酶活性？
答：ALP活性检测：胰酶消化方法1 4 1中培养的WT与Gm5532 KO BMSCs，WT及Gm5532KO将细胞按照1×104 孔接种在96孔板中，细胞贴壁后进2026-09-28
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问：如何进行BMSCs的成骨化诱导？
胰酶消化方法1 4 1中培养的WT与Gm5532 KO BMSCs，按照5×105 孔接种在6孔板中。2026-09-28
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问：如何检测BMSCs增殖能力？
答：待方法1 4 1中的WT与Gm5532 KO BMSCs铺满60mm培养皿底部约70％；将细胞按照1×103 孔接种在96孔板中，待贴壁后分别在不同天数收2026-09-28
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问：BMSCs如何提取并进行形态学观察？
答：无菌分离出WT与Gm5532 KO小鼠的股骨，培养基反复冲洗骨髓腔，获得骨髓细胞，37℃5％CO2培养。待细胞贴壁后，去除悬浮细胞，获得BMSCs2026-09-28
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问：Gm5532 KO对成骨细胞分化标志基因表达有什么影响？
答：在0d，WT与Gm5532 KO BMSCs无显著性差异；在6d，与WT BMSCs相比，Gm5532 KO BMSCs OPN和 COL1A1基因表达无显著性差异，OC、DMP12026-09-28
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问：Gm5532 KO对成骨细胞矿化结节形成有什么影响？
答：茜素红染色后观察到WT BMSCs相较Gm5532 KO出现更多的酒红色染色的矿化结节。结果显示两种细胞的矿化面积之间存在显著性差异。出自《2026-09-28
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问：Gm5532 KO对成骨细胞ALP活性有什么影响？
答：使用碱性磷酸酶检测试剂盒，在405nm下测其吸光度值，检测成骨细胞ALP的活性变化。WT BMSCs ALP活性在第6 d时吸光度值达到峰值，相比2026-09-28
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问：Gm5532KO对BMSCs分化形态有什么影响？
答：BMSCs分化诱导21d后，WT BMSCs排列紧密，出现矿化结节；与WTBMSCs比较，Gm5532KOBMSCs稀释，未完全铺满整个培养皿，未充分贴壁，没有2026-09-28
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大会时间：2026/11/19
